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Un kit di analisi della lattato deidrogenasi (LDH) fornisce un metodo altamente sensibile e rapido per misurare l'attività dell'LDH. L'enzima reagisce con una sonda specifica per formare un colore. I kit di analisi dell'attività LDH possono rilevare livelli da uno a cento mU/ml. Il completamento del test richiede meno di 30 minuti. Sono adatti anche per analisi ad alta produttività.
La lattato deidrogenasi (LDH) è un enzima citosolico solubile
LDH è un enzima citosolico che catalizza la sintesi di lattato e piruvato nel corpo. Le sue concentrazioni nel corpo possono essere indicative di danni cellulari e sono comunemente usate come biomarcatori. L'attività dell'LDH era più alta nell'EDL, seguita dal diaframma, e più bassa nel SOL. Nel siero erano presenti cinque diversi isoenzimi e ciascun muscolo conteneva un modello specifico di isoenzimi LDH. L'EDL era il più abbondante, contenente un'elevata percentuale di LDH-5, mentre il diaframma aveva l'attività più bassa.
L'LDH viene rilasciato dalle cellule quando l'integrità della membrana plasmatica è compromessa. Al contrario, l’apoptosi comporta la rottura articolata di una cellula in corpi apoptotici legati alla membrana. Questo enzima è anche una misura generale della permeabilità della membrana plasmatica. Il test di citotossicità LDH-Glo(tm) fornisce un semplice metodo bioluminescente per quantificare i livelli di LDH in campioni con un basso numero di cellule, come sferoidi di microtessuti 3D, cellule primarie e cellule staminali.
L'attività dell'LDH è influenzata dal pH. In questo esperimento, l'attività LDH è stata misurata nel mezzo GTSF-2 (pH 7,4-7,2) e le barre di errore rappresentano errori standard. Per n = 4 celle, differenze significative sono state determinate mediante il test dei ranghi con segno di Wilcoxon o il test t di un campione. Una volta corretto l'equilibrio del pH, l'attività dell'LDH aumenta nelle cellule e il livello dei livelli di glucosio cellulare diminuisce.
È un indicatore affidabile della vitalità cellulare
Il numero di cellule vitali in un campione è un indicatore della vitalità cellulare. La vitalità cellulare gioca un ruolo chiave in tutte le forme di coltura cellulare. I test di vitalità cellulare vengono utilizzati anche per correlare il comportamento cellulare con il numero di cellule vitali. I test di vitalità cellulare sono popolari nell'industria farmaceutica, dove i ricercatori utilizzano una varietà di metodi per selezionare terapie per una varietà di malattie. Molte terapie sviluppate prendono di mira le cellule tumorali.
Questo kit di analisi è facile da usare, poco costoso e offre risultati riproducibili. Elimina la necessità di preparazione manuale ed è adatto per piastre da 96 e 384 pozzetti. Il kit del test include tutti i reagenti necessari, inclusa una piastra a 96 pozzetti. Il kit include anche un protocollo che contiene istruzioni dettagliate. La citometria a flusso è una scelta eccellente per determinare la vitalità cellulare in laboratorio.
Il kit di vitalità delle cellule blu Alamar è disponibile presso Bio-Rad e Thermo Fisher Scientific. Sono inoltre disponibili il reagente per il test di vitalità delle cellule blu G-Biosciences Alamar e il reagente per il test Cell-Quant AlamarBlue. Con questo kit puoi anche verificare la vitalità delle cellule crioconservate. Dovresti considerare il tipo di cellula prima di scongelare le cellule crioconservate. È inoltre importante utilizzare il reagente del test appropriato per la dimensione della cellula.
È testato e convalidato
L’importanza di validare un test diagnostico non sfugge ai medici. Per convalida si intende il processo decisionale basato su una particolare interpretazione dei dati di una valutazione. I test diagnostici sono preziosi solo quando influenzano le decisioni e se portano a cambiamenti significativi nella gestione di un paziente. Ai medici viene insegnato a evitare di prescrivere test che non cambino la gestione. Un primo esempio di validazione di un test è il test PSA, che è altamente affidabile e fortemente associato alla diagnosi di cancro alla prostata.