NEFA Assay Kit è uno strumento per la quantificazione dei NEFA

Kit di analisi NEFA è uno strumento per la quantificazione dei NEFA (Ossido Nitrico). Viene utilizzato per determinare la concentrazione di NEFA in campioni di sangue o tessuti. Il NEFA è un nutriente vitale responsabile della regolazione del metabolismo energetico, dell'eccitabilità cardiaca, della conduzione neuromuscolare, della pressione sanguigna e della coagulazione del sangue. Si trova principalmente nelle ossa, nei muscoli, nei tessuti molli e nei globuli rossi.

Preparazione

NEFA è una piccola proteina da 50,2 kDa che ha la capacità di legarsi al DNA. È un complesso citosolico di acido grasso sintasi di tipo I (FAS) che produce acido palmitico non esterificato. In presenza di acil-CoA ossidasi (ACS), il complesso FAS ossida la 3-metil-N-etil-N-(b-idrossietil)-anilina in 4-amminoantipirina, che è il precursore molecolare dell'acetil-CoA. Questo processo è un processo enzimatico cruciale per tutti gli organismi eucariotici.

Anche se i NEFA potrebbero non avere la massa di un grasso, sono un’importante fonte di combustibile per i tessuti periferici. Viene metabolizzato dal fegato e viene trasportato complessato con l'albumina ai tessuti periferici. Il NEFA viene rilasciato anche da un dominio tioesterasi (TE) del complesso FAS.

Pipettaggio

I kit ELISA vengono utilizzati per rilevare piccoli composti chimici, proteine ​​e peptidi. Questi kit sono basati su proteine ​​ricombinanti espresse in E.coli. I kit non contengono azide, thimerosal e altre risorse naturali.

Nel kit sono presenti reagenti come BSA, tampone di diluizione apirogeno e soluzione di lavaggio. La soluzione di lavaggio è stabile per due settimane a 2-8°C. Il tampone di diluizione contiene soluzione fisiologica allo 0,9%.

Il kit ha uno standard NEFA interno. A questo viene aggiunto NEFA a una concentrazione che corrisponde alla concentrazione prevista nel campione. Viene misurata l'assorbanza del pigmento blu-viola a 546 nm per calcolare la concentrazione di NEFA nel campione.

Colorimetrico

L'utilizzo del kit WAKO NEFA ha prodotto una serie di risultati, inclusi alcuni privi di senso. Tuttavia, il kit NEFA è un degno contendente quando si tratta di determinare il contenuto relativo di acidi grassi nei campioni di tessuti animali. In quanto tale, il kit NEFA è uno dei test di laboratorio più popolari. Il kit viene fornito con le istruzioni per testare diversi tipi di campioni, tra cui sangue, siero, saliva e una varietà di lipidi.

La parte più interessante del kit è che può essere utilizzato per misurare una varietà di acidi grassi, compresi quelli comunemente presenti nei lipidi. Il kit viene fornito con una gamma di enzimi progettati per rilevare una varietà di acidi grassi, inclusi gli acidi grassi C-8 e C-16 presenti nell'uomo e negli animali. Tuttavia, il kit non è consigliato per l'uso con concentrazioni di FFA ad alta precisione in un ampio intervallo.

Elettrochimico

I NEFA sono acidi grassi importanti per la salute umana, ma vengono raramente valutati. Inoltre, il loro rilevamento è molto costoso. Pertanto, il monitoraggio dei cambiamenti nelle loro concentrazioni può aiutare a prevenire e gestire più accuratamente le malattie. In questo studio è stato sviluppato un kit di analisi elettrochimica per NEFA, utilizzando PDA-MWCNT come superficie del sensore. Questo elettrodo ha mostrato una buona attività elettrocatalitica per le fasi di ossidazione dei NEFA e potrebbe essere utilizzato in applicazioni reali.

L'elettrodo enzimatico era costituito da una pellicola composita multistrato di PDA-MWCNT e ACOD, ACS e polimero. L'ordine degli strati è stato scelto per corrispondere all'ordine della reazione enzimatica. È stato stabilito che ACS e ACOD sono rimasti biologicamente attivi nel film.

Concentrazione di NEFA nel T2D

Le concentrazioni di NEFA nel sangue sono state studiate nel contesto dell'obesità e dell'ipertensione. È stato dimostrato che questi composti promuovono l’aumento della pressione arteriosa attraverso la stimolazione α1-adrenergica e aumentano lo stress ossidativo. I NEFA sono anche associati alla sindrome metabolica. Questi composti possono essere importanti nello sviluppo dell’ipertensione.

Sono stati proposti diversi modelli per descrivere la risposta plasmatica dei NEFA a un test di glucosio per via endovenosa. Il modello di Boston rappresentava accuratamente la quarta fase di aumento della concentrazione di NEFA. Tuttavia, il modello non descrive la fase di latenza iniziale. Il modello Fabian utilizzava una semplice pendenza esponenziale per descrivere questa fase. Allo stesso modo, il modello Thomaseth non è stato in grado di descrivere la fase di rimbalzo.

Livelli di NEFA nei trigliceridi

Numerosi studi hanno studiato gli effetti della chirurgia bariatrica sulla composizione dei NEFA plasmatici. In una meta-analisi pubblicata nel 2016, i livelli sierici di NEFA erano diminuiti a 6 e 12 mesi dopo l’intervento chirurgico. Ciò potrebbe essere dovuto alla riduzione dei livelli di insulina. In un altro studio, i NEFA plasmatici sono stati misurati in un gruppo di pazienti obesi prima e dopo l’intervento chirurgico di bypass gastrico Roux-en-Y.

Le concentrazioni di sette NEFA erano diminuite 9 mesi dopo l'intervento. Il linoleato (un acido grasso omega-6) è stato ridotto di 18:2, lo stearato di 18:0 e l'oleato di 16:0. La concentrazione di docosaesaenoato, tuttavia, non è stata influenzata. I NEFA sono stati convertiti in esteri metilici degli acidi grassi (FAME). Questi sono stati poi analizzati mediante gascromatografia-spettrometria di massa (GC-MS).